DETERMINACIÓN DE PAHS EN PECES Y MOLUSCOS

Tras la extracción de las muestras de mejillón silvestre , utilizando como disolvente una mezcla de hexano:acetona. Se limpia el extracto en columna cromatográfica con relleno de alúmina desactivada al 10% con agua milli-Q. A continuación, se recoge y se concentra en rotavapor. Se le añade Acetonitrilo, se concentra en corriente de Nitrógeno para que se evapore el disolvente y le añade patrón interno. Después se inyecta en el cromatógrafo.

Se utiliza la cromatografía de líquidos de alta eficacia acoplada a un detector de fluorescencia con longitud de onda programable y para cada compuesto se usan las longitudes de onda de excitación y emisión de la tabla.

La temperatura de la columna influye en la termodinámica y cinética de la separación. Aunque, la eficacia aumenta al elevar la temperatura esto implica una reducción importante de la selectividad.

En la siguiente tabla se presentan las condiciones cromatográficas.

Se utilizan patrones, para realizar las rectas de calibrado con cada grupo de muestras que se analizan en el HPLC. Haciendo rectas de calibrado para cada compuesto y secuencia de análisis y obteniendo para todos los PAHs estudiados coeficientes de correlación en las rectas de calibrado superiores a 0,999.

Los límites de detección (LD) y cuantificación (LC) determinados experimentalmente a partir de la concentración de analito que origina una relación señal ruido (S/N) igual a 3 o a 10 respectivamente. La siguiente tabla presenta los resultados (en μg/kg p.s.).